荧光符号刀豆球蛋白A(Concanavalin A, Con A)是一种在生物研讨和医学确诊中大规模的运用的技能。这种技能经过将荧光染料与Con A共价结合,运用荧光染料的特性来调查和研讨Con A与糖类分子的相互作用。以下是关于荧光符号刀豆球蛋白A的具体解析: 荧光符号所依靠的化合物称为荧光物质,这些物质具有共轭双键系统化学结构,当遭到紫外光或蓝紫光照耀时,可激起成为激起态,当从激起态康复基态时,宣布荧光。荧光符号技能则是运用荧光物质共价结合或物理吸附在所要研讨分子的某个基团上,运用它的荧光特性来供给被研讨目标的信息。 将Con A溶解在磷酸盐缓冲液(PBS)中,一般浓度为1-10 mg/mL,保证充沛溶解。 将Cy5-NHS酯溶解在无水二甲基亚砜(DMSO)中,配制成几毫摩尔浓度的溶液。Cy5-NHS酯可以与蛋白质中的伯胺基团(主要是赖氨酸残基上的氨基)共价结合。 将Cy5-NHS酯溶液缓慢参加Con A溶液中,悄悄混合以防止发生气泡。 将反响混合物在室温或4°C下孵育1-2小时,期间悄悄拌和。反响时间和温度应根据试验条件来优化,以保证Cy5与Con A的结合。 反响完成后,需求去除未反响的Cy5-NHS酯。常用的办法是透析或凝胶过滤。 透析法将反响混合物置于透析袋中,放入恰当的缓冲液中,定时替换缓冲液,直至不再有游离的Cy5扩散出。 凝胶过滤法运用恰当的凝胶过滤柱,将反响混合物经过柱子别离,搜集符号后的Con A。 经过紫外-可见分光光度计测定Cy5的吸光度,计算出符号度。Cy5的最大吸收波长约为649 nm。适宜的符号度一般在2到8个Cy5分子/Con A分子之间,不可能影响Con A的生物活性。 特别声明:以上内容(如有图片或视频亦包含在内)为自媒体渠道“网易号”用户上传并发布,本渠道仅供给信息存储服务。 森林狼双加时绝杀横扫掘金:约基奇61+11+10生计新高 华子34+10+8 家装榜首股东易日盛资金链断裂线事端后续:电池成焦点 宁德年代否定比亚迪缄默沉静 这便是来自当妈的直觉吗?一个回身便知道孩子的主意又及时阻止,网友:料事如神啊,夫人 博主教宝宝念英文字母,没想到宝宝也是语出惊人,网友:理解能力很强,没缺点